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為您分析elisa試劑盒定量與定性測試

更新時間：2021-04-21 點(diǎn)擊次數(shù)：2285次

　　ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來，得到*科研工作者的認(rèn)可及推崇，在歐美及中國獲得很大的推廣，尤其是國內(nèi)生化領(lǐng)域的長足發(fā)展。ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原牽9體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)由于抗原抗體的反應(yīng)在一種固相載體聚苯Z烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入-種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性在實(shí)際應(yīng)用中通過不同的設(shè)計具體的方法步驟可有多種.即用于檢測抗體的間接法用于檢測抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法.

　　一ELISA試劑盒定量測試

　　ELSIA操作步驟復(fù)雜影響反應(yīng)因素較多,特別是固相載體的包被難達(dá)到各個體之間的一致因此在定量測定中,每批測試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA,.標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬,曲線點(diǎn)的吸光度可接近2.0,繪制時常用半對數(shù)紙以檢測物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)將各濃度的值逐點(diǎn)連接所得曲線一般呈S形其頭尾部曲線趨于平坦中央較呈直線的部分是理想的檢測區(qū)域

　　二ELISA試劑盒定性測試

　　定性測定的結(jié)果判斷是對受檢標(biāo)本中是否含有待測抗原或抗體作出”有"或"無"的簡單回答分別用"陽性" "陰性示:陽

　　性"表示該標(biāo)本在該測定系統(tǒng)中有反應(yīng):陰性則為無反應(yīng)用定性判斷法也可得到半定量結(jié)果，即用滴度來表示反應(yīng)的強(qiáng)度其

　　實(shí)質(zhì)仍是一個定性試驗(yàn).在這種半定量測定中將標(biāo)本作-系列稀釋后進(jìn)行試驗(yàn)，呈陽性反應(yīng)的稀釋度即為滴度根據(jù)滴度的高低,可以判斷標(biāo)本反應(yīng)性的強(qiáng)弱，這比觀察不稀釋標(biāo)本呈色的深淺判斷為強(qiáng)陽性弱陽性更具定量意義。

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